目的：三阴性乳腺癌是乳腺癌中一类预后较差、缺乏治疗靶点的肿瘤。既往研究表明，微管相关蛋白在乳腺癌的发生发展中发挥重要作用，但是缺乏相关深入的研究。本研究重点对三阴性乳腺癌中有预后意义的微管相关蛋白进行筛选、生物学机制研究及治疗靶点的探索。
方法：根据245例三阴性乳腺癌患者的转录组数据，筛选出三阴性乳腺癌中提示较差预后的微管相关蛋白，再通过体外小室迁移实验初步确定待研究的微管相关蛋白。而后通过定量聚合酶链反应、免疫组织化学、载体克隆、细胞转染、病毒包装、体外小室迁移侵袭实验、体外增殖实验、体内裸鼠脂肪垫成瘤实验、免疫印迹、免疫沉淀、细胞培养物氨基酸稳定同位素标记定量蛋白质组学、细胞计数等实验，研究该微管相关蛋白在三阴性乳腺癌中的生物学功能和潜在机制。并通过生存曲线分析、t检验、卡方检验、相关性分析等进行统计分析。
结果：根据转录组数据，我们筛选出在三阴性乳腺癌中预后较差且影响迁移能力的微管相关蛋白：筑丝蛋白4（TEKT4）。为进一步分析TEKT4对三阴性乳腺癌的预后意义，我们对另一个由145例三阴性乳腺癌患者组成的独立队列进行免疫组织化学染色，发现TEKT4低表达提示患者较差生存。通过体内、体外的功能实验，发现TEKT4低表达可促进三阴性乳腺癌侵袭转移，但对增殖没有影响。在机制方面，TEKT4可以与微管组蛋白脱乙酰酶HDAC6和α-微管蛋白均发生相互作用。TEKT4正常表达情况下，可以减弱HDAC6对微管的脱乙酰作用，促进微管的稳定性。我们进一步发现，TEKT4低表达的细胞系、小鼠模型和类器官模型均对HDAC6特异性抑制剂ACY1215（ricolinostat）更加敏感，且有效抑制由TEKT4低表达引起的三阴性乳腺癌侵袭转移表型。三阴性乳腺癌临床标本证实：TEKT4与微管稳定性标志物乙酰化微管蛋白存在表达的正相关，并且TEKT4和乙酰化微管蛋白同时低表达的患者生存较差。
结论：微管相关蛋白TEKT4与三阴性乳腺癌不良预后密切相关，可以促进三阴性乳腺癌发生侵袭转移。TEKT4低表达通过增加HDAC6对微管的脱乙酰功能，从而降低微管稳定性，促进三阴性乳腺癌进展。应用HDAC6抑制剂ACY1215可有效抑制三阴性乳腺癌转移，为三阴性乳腺癌靶向治疗提供新思路。
引用来源：葛丽萍, 金希, 邵志敏, 等. 微管相关蛋白TEKT4调控三阴性乳腺癌侵袭转移的机制研究. 第十六届全国乳腺癌会议暨第十五届上海国际乳腺癌论坛论文汇编. 2020:E032.
